Autoclavar juntos
el fosfato y el agar inhibe el crecimiento de las bacterias
Un grupo de
investigadores japoneses (1) han descubierto que la
preparación de los medios de cultivo con agar, que llevamos haciendo desde
los tiempos de Koch, puede inhibir el crecimiento de muchas bacterias. En
realidad es un hecho conocido que el número total de células en un cultivo no
suele coincidir con las que se cuentan sobre una placa de Petri, pero hasta
ahora no sabíamos la razón. Estos autores han descubierto que cuando se
autoclavan juntos el fosfato y el agar para preparar un medio sólido, la
cantidad de colonias bacterianas totales que se obtiene es 50 veces menor que
cuando se autoclavan de forma separada. Autoclavar
juntos el agar y el fosfato genera compuestos tóxicos que inhiben el
crecimiento bacteriano. El análisis químico sugiere que esta inhibición del
crecimiento es debida a la producción de peróxido
de hidrógeno (H2O2),
un agente oxidante tóxico.
Además,
secuenciaron un total de 6.528 colonias bacterias que crecían en los distintos
medios. Comprobaron que en los
medios con el fosfato autoclavado por separado había más de un 30% de géneros
bacterianos clasificados como “no cultivables” que no crecían en los medios con fosfato
y agar autoclavados juntos. Han comparado también los resultados de la
secuenciación masiva de muestras ambientales con el cultivo. Como cabía
esperar, observaron que la secuenciación revelaba muchos más grupos bacterianos
que el cultivo: por ejemplo, mediante secuenciación directa fueron capaces de
detectar 53 grupos bacterianos en muestras de suelo, pero solo 6 fueron capaces
de crecer en los medios de cultivo. Esto confirma la idea de que la mayoría de los microorganismos
ambientales son no cultivables.
(1) A hidden
pitfall in the preparation of agar media undermines microorganism
cultivability. Tanaka T, et al. Appl Environ Microbiol. 2014. 80(24):7659-7666.